ДЕРАТИЗАЦИОННЫЕ СРЕДСТВА -  ПРЕПАРАТЫ БАКТЕРИЙ (устаревшая информация!!!)

Жидкие микробные препараты. В качестве питательных сред используются мясо-пептонный бульон, среда из пивных и пекарских дрожжей, молоко, горох, сывороточно-кровяная и гидролизные среды. Оказались пригодными также гидролизаты отходов производства пенициллина, гидролизина, а также рыбный гидролизат.

Технология производства жидких бактериальных препаратов для уничтожения грызунов проста и сводится к следующему. Среду, разлитую в бутылки или колбы, автоклавируют при температуре 120° в течение 30-40 мин. Засевают маточной культурой, приготовленной из стандартных штаммов бактерий тифа грызунов, которые Всесоюзный научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии рассылает по заявкам лабораторий в пробирках (на скошенном МПА), в ампуле (на среде Мережковского) или в виде сухого препарата (зерна или гранулы в пробирке).

Колонии бактерий на МПА должны быть использованы не позднее 5-7 суток после получения штаммов. Для этого в стерильных условиях в пробирку с культурой бактерий на МПА вносят 5-7 мл стерильного физиологического раствора или МПБ, вращательными движениями смывают с поверхности агара колонии бактерий и полученной суспензией засевают жидкую питательную среду из расчета 1 мл взвеси бактерий на 250 мл среды (маточная культура).

Штаммы бактерий, полученные в ампулах со средой Мережковского, используют в течение 1-2 мес. Перед применением тщательно взбалтывают и вскрывают, после чего пересевают по капле пастеровской пипеткой в пробирки со стерильной средой Мережковского. Пробирки выдерживают сутки в термостате при температуре 37°. Сохраняют в темном прохладном помещении или в холодильнике при температуре от 2 до 15° в течение 1-2 мес. Для получения маточной культуры высевают из расчета 1 мл на 200 мл среды.

Из сухого препарата бактерий засевают 3-5 комочков или гранул на скошенный МПА. Выросшие колонии пересевают на жидкую среду по описанной выше методике.

Маточную культуру в сосудах емкостью до 2 л выращивают 24 часа, а более 2 л - 48 часов при температуре 37°. После этого ее проверяют на чистоту в мазке, окрашенном по Граму, и высевом на МПА и МПБ.

Для приготовления жидкого микробного препарата в сосуды со средой добавляют 10 мл маточной культуры на каждый литр среды. Выращивают при тех же условиях, что и маточную культуру.

Сосуды с готовым препаратом закрывают корковой или резиновой пробкой над пламенем горелки. После этого заливают сургучом или смолой. На сосуды наклеивают этикетки с обозначением наименования бактерий, даты изготовления, срока годности, номера серии, названия питательной среды.

Для контроля 3% сосудов проверяют на чистоту, рН и устанавливают титр бактерий методом предельных разведений.

В 1 мл жидкого препарата должно быть не менее 400 млн. живых бактерий при отсутствии посторонней микрофлоры. Срок годности от 40 до 50 суток.

Недостатками жидких препаратов являются малый срок годности, слабая устойчивость к минусовым температурам и солнечному свету, невысокий титр бактерий, необходимость добавления приманочного продукта.

Смертельная доза жидкого препарта для одной мыши или полевки составляет 1 мл, для крысы - 10 мл. На 1 часть препарата добавляется 2 части приманочного продукта (муки, комбикорма, крупы отрубей, вареных овощей и др.). Жидкий препарат вливают при постоянном помешивании в продукт и готовят густое тесто. Раскатывают его в виде цилиндров диаметром 2 см к режут на куски весом 5-30 г. Можно использовать сухари в соотношении 1 : 1. Выдерживают 1-2 часа. Приманки используют в день приготовления.

Микробные препараты на плотных питательных средах гранулированной структуры. Питательной средой служат зерна ржи, пшеницы, овса, ячменя, а также фибрин крови убойных животных, костные опилки.

Зерновой бактериальный препарат представляет собой сыпучую массу влажностью 50-59% размягченного и разбухшего целого зерна, внутри и на поверхности которых имеются бактерии тифа грызунов. В 1 г препарата содержится от 2 до 8 млрд. микробных тел, а в одном зерне - 200-500 млн. бактерий. Смертельная доза препарата содержится в 1-2 зернах (0,1-0,2 г) для мышей и полевок и в 10-20 зернах (1-2 г) для крыс.

Препарат не должен иметь постороннего запаха. Может храниться в сухих помещениях при температуре от 4 до 25° в течение 3 месяцев. Применяется без добавления других приманочных продуктов, так как сам является хорошей приманкой для грызунов. Важным его преимуществом перед жидкими бактериальными препаратами является возможность длительного сохранения зимой при низких температурах.

Процесс изготовления препарата включает следующие этапы: изготовление жидкой маточной культуры из штамма бактерий; изготовление зерновой среды; засев и выращивание культуры на зерновой среде; контроль препарата.

Изготовление жидкой маточной культуры описано выше.

Для зерновой среды используется чистое, зрелое, вполне доброкачественное зерно. Целое зерно фасуют в чистые стеклянные широкогорлые 3-литровые сосуды до половины их емкости (1 кг на каждый сосуд), промывают 3-4 раза водой. После этого зерно замачивают, залив водой на 1 см выше уровня среды. После 18-24-часового замачивания удаляют с поверхности мякину, воду сливают, зерно промывают водой 2-3 раза. Добавляют в сосуды дополнительно 10-15% чистой воды вместе с несколькими мл 20%-ного раствора углекислой соды.

Бутыли закрывают ватной пробкой, обвязанной марлей, закрывают плотной бумагой и завязывают вокруг горла сосуда шпагатом. Стерилизуют в автоклаве при температуре 120° по 1 часу два дня подряд. После этого проверяют стерильность зерна путем высева 3-5 зерен на МПБ и МПА из 3% сосудов.

Стерильные среды из зерна засевают жидкой маточной культурой бактерий в количестве 500 мл на 1 кг зерновой среды (1:2). Сосуд тщательно встряхивают, не замачивая пробки, и помещают в термостат при температуре 37-38° на 24-48 часов. После 12 часов рекомендуется несколько раз встряхивать бутыли.

Препараты бактерий проверяют на чистоту путем высева на МПБ и МПА, устанавливают титр бактерий в 1 г методом предельных разведений и вирулентность - скармливанием подопытным грызунам.
Транспортируется препарат в тех же бутылях, в которых выращивали, а также в мешочках из медицинской клеенки или полиамидной пленки.

Применяется путем раскладывания столовой ложкой в специальные дератизационные кормушки, чашки, на кусочки фанеры или картона из расчета 100-150 г на 100 м² площади помещения.

Фибринная среда готовится из крови убойных животных и представляет собой сыпучую массу светло-желтого цвета, состоящую из отдельных частиц - гранул. Влажность ее 6,5-8,5%. Может сохраняться в герметической упаковке свыше года. Перед производством микробного препарата ее фасуют в стеклянные широкогорлые банки, заполняя одну треть емкости, стерилизуют и засевают маточной культурой (1:2). Методика приготовления и контроля такие же, как при приготовлении зернового препарата.

Срок годности препарата без высушивания при хранении в стеклянных банках 10-15 суток. Титр бактерий 5-30 млрд.

Костные опилки или стружки являются отходом косторезного и пуговичного производства. Это сыпучая масса белого цвета, влажность 7-9%. Методика изготовления препарата такая же, как и при производстве препарата бактерий на зерне. Титр бактерий составляет 5-9 млрд. Срок годности препарата без высушивания при хранении в стекляных сосудах 10-15 суток, в полиамидных мешочках - 2 месяца.

Препарат бактерий тифа грызунов можно изготавливать также на костно-фибринной (к костным опилкам добавляют 10-20% фибринной среды) и костно-картофельной средах.

Бактериальные препараты на плотных средах животного происхождения скармливают грызунам с приманками (мука, хлебная крошка, комбикорм и др.) в соотношении 1:2. Готовят приманки в чистой стеклянной или эмалированной посуде, добавляя воду до получения густого теста. Раскатывают в виде цилиндров и разделяют на порции весом 15-25 г каждая. Раскладывают из расчета 100-250 г на каждые 100 мг площади (в зависимости от степени заселения грызунами). Приманки пересыпают мукой, чтобы они не склеивались, и используют в день приготовления, ежедневно заменяя свежими.

Сухие микробные препараты. Преимуществом сухих микробных препаратов является более длительное время хранения (свыше года), стойкость, удобность транспортировки, возможность применения в любое время года в различных географических и хозяйственных условиях. Их используют для обработки больших площадей с помощью самолетов или автомашин с разбрасывателями.
Сухие микробные препараты производятся на костных опилках зерновых, фибринных и других плотных средах, имеющих гранулированную структуру.

Препараты изготавливаются по описанной ранее методике, после чего подвергаются высушиванию разными способами. После высушивания сохраняется 40-80% жизнеспособных бактерий, влажность 6-8%. Фасуют в стерильных условиях в бидоны с прокладкой из бумаги, в многослойные бумажные мешки (крафтовые) или в мешки из полиамидной пленки. Тару герметически закрывают и наклеивают этикетки. Препарат хранят в темном, сухом, прохладном помещении при температуре 2-10°. Срок годности 1 год. Можно хранить в неотапливаемых помещениях при отрицательных температурах.

В процессе хранения часть микробов погибает, поэтому через 5 месяцев после изготовления при обработке используется двойное количество препарата. Можно производить реактивацию замачиванием сухого бактериального препарата водой с выдерживанием в течение 12 часов при температуре 25-35° или в термостате при 37-38°. При этом количество микробных клеток восстанавлива-
Выпускается также сухой аминокислотный препарат бактерий тифа мышевидных грызунов. Он представляет собой порошковидную сыпучую массу серого цвета или сухие отрезки в виде гранул темно-серого цвета размером 1-2 см. Для его изготовления используют отходы мясокомбината. Фасуют по 0,2-5 кг в полиэтиленовые или крафтовые мешки. Хранят в хорошо вентилируемом  помещении при температуре 2-10°. Срок годности сухого порошковидного препарата 3 года, а гранулированного - до 1 года (гранулы не подвергаются реактивации). В 1 г содержится 100-300 млн. бактерий.

Реактивацию проводят путем добавления кипяченой остуженной до 30-36° воды в соотношении 1:1 и выдерживают при температуре 30-36° в течение 12 часов, 2-3 раза перемешивая. Реактивацию можно проводить в полиэтиленовых мешках или в эмалированной посуде. После этого количество бактерий достигает не менее 8-10 млрд. в 1 г. Количество посторонней микрофлоры допускается до 3%.

Сухой аминокислотный гранулированный препарат скармливают грызунам без приманки. К сухому порошковидному препарату добавляют приманочный продукт, увлажняют водой до образования густого теста. Реактивированный препарат хорошо прилипает к приманке. Готовую приманку применяют в день изготовления, ежедневно заменяя свежей.

Доза сухого препарата для заражения одной крысы равна 0,5-0,3 г, одной мыши или полевки - 0,1-0,2 г. На 100 м² площади помещения расходуется 50-100 г сухого гранулированного или 20-50 г порошковидного препарата.